葉綠素是植物光合作用的重要光合色素，常見的有葉綠素a、b、c、d四種類型，其中葉綠素a是一種能將光合作用的光能傳遞給化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)的唯一色素，葉綠素b、c、d等吸收的光能均是通過(guò)葉綠素a傳遞給化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)的。通過(guò)測(cè)定葉綠素a，可掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力，了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的現(xiàn)存量。試驗(yàn)表明，當(dāng)葉綠素a質(zhì)量濃度升至10 mg/m3以上并有迅速增加的趨勢(shì)時(shí)，就可以預(yù)測(cè)水體即將發(fā)生富營(yíng)養(yǎng)化。因此，可將葉綠素a含量作為評(píng)價(jià)水體富營(yíng)養(yǎng)化并預(yù)測(cè)其發(fā)展趨勢(shì)的指標(biāo)之一。
葉綠素a的測(cè)定方法有高效液相色譜法、分光光度法和熒光光譜法。高效液相色譜法精確度高，但操作步驟煩瑣。目前最常用的是分光光度法和熒光光譜法。分光光度法是常規(guī)的分析法，儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，靈敏度高，但是操作繁瑣，分析耗時(shí)長(zhǎng)。此方法還需要對(duì)樣品進(jìn)行復(fù)雜的前處理過(guò)程，很難滿足水體藻類實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)要求?，F(xiàn)場(chǎng)葉綠素a檢測(cè)方法建議使用熒光法，熒光法測(cè)定葉綠素a應(yīng)用廣泛,該方法測(cè)定快速、操作簡(jiǎn)單,無(wú)須任何試劑。
方法原理：當(dāng)丙酮提取液用436 nm的紫外線照射時(shí)，葉綠素a可發(fā)射670 nm的熒光，在一定濃度范圍內(nèi)，發(fā)射熒光的強(qiáng)度與其濃度成正比，因此，可通過(guò)測(cè)定樣品丙酮提取液在436 nm紫外線照射時(shí)產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度，定量測(cè)定葉綠素a的含量。比起實(shí)驗(yàn)室的萃取法操作極為簡(jiǎn)單，高，量程大，非常適用于地表水、水源水的在線及便攜使用以及實(shí)驗(yàn)室便攜使用。葉綠素的含量可以反映水體富營(yíng)養(yǎng)化的程度。 |
